毒胡萝卜素诱导细胞内钙离子含量升高的检测?
最近在做细胞内钙离子检测的实验。具体做法是用不同浓度(从0.1微摩到5微摩)的毒胡萝卜素诱导细胞(4T1、B16、CT26)24小时,然后消化,用不含钙的PBS洗。加钙离子荧光探针Fluo-4-AM 在37度下孵育半小时,再用不含钙的PBS洗。最后用流式检测。试了不同浓度的毒胡萝卜素、不同的细胞系,每次测出来的结果都没有显示钙离子含量升高,有的组还会出现减少的情况。请问有人做过这个实验吗?可以帮帮忙看看是哪里出了问题了吗?非常感谢! 看到有人再清洗细胞时候,用的是含钙的任氏液,已经下单了,准备试试。除此之外不清楚还有没有别的影响因素?恳请各位老师同学指教!再次感谢各位!