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用于细胞内钾离子浓度成像的基因编码荧光指示剂。

Communications Biology ( IF 5.2 ) Pub Date : 2019-01-14 , DOI: 10.1038/s42003-018-0269-2
Yi Shen 1, 2 , Sheng-Yi Wu 2 , Vladimir Rancic 3 , Abhi Aggarwal 2 , Yong Qian 2 , Shin-Ichiro Miyashita 1 , Klaus Ballanyi 3 , Robert E Campbell 2, 4 , Min Dong 1
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钾离子 (K+) 稳态和动力学在生物活动中发挥着关键作用。在这里,我们描述了三种基因编码的 K+ 指标。 KIRIN1(钾 (K) 离子比例指示剂)和 KIRIN1-GR 是基于 Förster 共振能量转移 (FRET) 的指示剂,其中细菌 K+ 结合蛋白 (Kbp) 分别插入荧光蛋白 FRET 对 mCerulean3/cp173Venus 和 Clover/mRuby2 之间。 GINKO1(用于光学成像的 K+ 绿色指示剂)是一种基于单一荧光蛋白的 K+ 指示剂,通过将 Kbp 插入增强型绿色荧光蛋白 (EGFP) 中而构建。这些指示剂适合在体外和细胞内检测生理相关浓度的 K+。 KIRIN1 能够对活细胞中胞质 K+ 消耗以及培养神经元中 K+ 流出和再摄取进行成像。 GINKO1 与红色荧光 Ca2+ 指示剂结合使用,可以对神经元和神经胶质细胞中的 K+ 和 Ca2+ 动态进行双色成像。这些结果表明 KIRIN1 和 GINKO1 是细胞内 K+ 动态成像的有用工具。




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更新日期:2019-01-26
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