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新型同质阴阳探针可提高RT-qPCR检测低拷贝HIV RNA的敏感性
Talanta ( IF 5.6 ) Pub Date : 2018-10-16 , DOI: 10.1016/j.talanta.2018.10.043 Valentina M. Farzan , Maksim V. Kvach , Ilya O. Aparin , Dmitry E. Kireev , Tatiana A. Prikazchikova , Alexey V. Ustinov , Vadim V. Shmanai , German A. Shipulin , Vladimir A. Korshun , Timofei S. Zatsepin
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更新日期:2018-10-16
Talanta ( IF 5.6 ) Pub Date : 2018-10-16 , DOI: 10.1016/j.talanta.2018.10.043 Valentina M. Farzan , Maksim V. Kvach , Ilya O. Aparin , Dmitry E. Kireev , Tatiana A. Prikazchikova , Alexey V. Ustinov , Vadim V. Shmanai , German A. Shipulin , Vladimir A. Korshun , Timofei S. Zatsepin
带有荧光团/猝灭剂对的核酸被广泛用作生物医学研究和分子诊断中的探针。在这里,我们合成了在5'-和3'-末端用相同的染料(R6G,ROX和Cy5)双标记的新型DNA分子信标,并研究了它们的光物理性质。我们证明了通过在此类分子信标中形成同源二聚体激子来猝灭荧光,可以在均相测定中使用它们。此外,我们开发并评估了用相同染料标记的同源阴阳DNA探针,并将其用于通过RT-qPCR检测低拷贝HIV RNA。他们表现出更高的灵敏度(LLQ:10 vs 30份mL -1)与基于VIC-BHQ染料的市售Abbott RealTime HIV-1试剂盒相比,既适用于模型混合物(未添加血浆的人血浆中添加了灭活的HIV-1病毒),也适用于初步确认的36种临床样品(低剂量的4例对1例阳性)复制样本)。
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