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使用AFM和SPR探测蛋白受体-配体之间的二价相互作用的Y型三臂结构
Langmuir ( IF 3.7 ) Pub Date : 2018-05-21 00:00:00 , DOI: 10.1021/acs.langmuir.8b00735
Subhadip Senapati , Sudipta Biswas , Saikat Manna , Robert Ros , Stuart Lindsay , Peiming Zhang
Langmuir ( IF 3.7 ) Pub Date : 2018-05-21 00:00:00 , DOI: 10.1021/acs.langmuir.8b00735
Subhadip Senapati , Sudipta Biswas , Saikat Manna , Robert Ros , Stuart Lindsay , Peiming Zhang
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这项研究的目的是开发利用原子力显微镜(AFM)和表面等离振子共振(SPR)来研究受体与其配体之间的二价相互作用的键合化学。我们构想了一个三臂结构,该结构由柔性链组成,该柔性链连接到大型刚性核,在末端带有正交的官能团,用于形成和连接(或固定)二价配体。为了证明这一原理,我们选择了著名的生物素-链霉亲和素相互作用作为模型系统。根据生物素-链霉亲和素复合物的晶体结构,我们设计并合成了一种双生物素配体,该配体具有Y形,其臂上有两个生物素基序用于结合,茎上有一个功能基团用于固定或附着,称为γ-双生物素。第一的,我们发现,γ-双生物素配体比链霉亲和素在溶液中更能稳定链霉亲和素,这表明二价相互作用具有协同作用。γ-双生物素通过点击反应进行力测量实验,通过点击反应与AFM尖端连接,这表明从链霉亲和素上脱除双生物素所需的力是脱除单生物素的两倍。对于SPR研究,我们在γ-双生物素中添加了ω-硫醇化烷基链,以使其掺入单层。SPR数据表明,链霉亲和素从带有y-双生物素的混合单层中解离的速度比从带有单生物素的单层中解离的慢得多。这项工作证明了使用AFM和SPR研究二价相互作用的独特化学作用。这表明二价相互作用是协同的。γ-双生物素通过点击反应进行力测量实验,通过点击反应与AFM尖端相连,这表明从链霉亲和素上解脱双生物素所需的力是解脱单生物素的两倍。对于SPR研究,我们在γ-双生物素中添加了ω-硫醇化烷基链,以使其掺入单层。SPR数据表明,链霉亲和素从带有y-双生物素的混合单层中解离的速度比从带有单生物素的单层中解离的慢得多。这项工作证明了使用AFM和SPR研究二价相互作用的独特化学作用。这表明二价相互作用是协同的。γ-双生物素通过点击反应进行力测量实验,通过点击反应与AFM尖端连接,这表明从链霉亲和素上解脱双生物素所需的力是解脱单生物素的力的两倍。对于SPR研究,我们在γ-双生物素中添加了ω-硫醇化烷基链,以使其掺入单层。SPR数据表明,链霉亲和素从带有y-双生物素的混合单层中解离的速度比从带有单生物素的单层中解离的慢得多。这项工作证明了使用AFM和SPR研究二价相互作用的独特化学作用。这表明从链霉亲和素上解脱双生物素所需的力是解脱单生物素的力的两倍。对于SPR研究,我们在γ-双生物素中添加了ω-硫醇化烷基链,以使其掺入单层。SPR数据表明,链霉亲和素从带有y-双生物素的混合单层中解离的速度比从带有单生物素的单层中解离的慢得多。这项工作证明了使用AFM和SPR研究二价相互作用的独特化学作用。这表明从链霉亲和素上解脱双生物素所需的力是解脱单生物素的力的两倍。对于SPR研究,我们在γ-双生物素中添加了ω-硫醇化烷基链,以使其掺入单层。SPR数据表明,链霉亲和素从带有y-双生物素的混合单层中解离的速度比从带有单生物素的单层中解离的慢得多。这项工作证明了使用AFM和SPR研究二价相互作用的独特化学作用。
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更新日期:2018-05-21

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