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由祖先序列重建产生的高度热稳定性的羧酸还原酶。
Communications Biology ( IF 5.2 ) Pub Date : 2019-11-22 , DOI: 10.1038/s42003-019-0677-y Adam Thomas 1, 2 , Rhys Cutlan 1, 2 , William Finnigan 2 , Mark van der Giezen 2, 3 , Nicholas Harmer 1, 2
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羧酸还原酶（CAR）是具有工业重要性的生物催化剂。它们的特性，尤其是稳定性差，使其不适合在生物工业管道中使用。在这里，我们采用了祖先序列重建（ASR）——一种新兴的工程工具，可以识别整个蛋白质中稳定但酶中性的突变。我们使用三种算法方法来重建分枝杆菌和诺卡氏菌 CAR1 直系同源物的功能祖先。 Ancestral CAR（AncCAR）被证实是优先选择芳香族羧酸的 CAR 酶。祖先还表现出对溶剂、pH 值和体内盐浓度的不同耐受性。与经过充分研究的现有 CAR 相比，AncCAR 的 T m 高出 35 °C，半衰期比之前观察到的最长半衰期长九倍。通过祖先重建，我们用三种新的热稳定 CAR 酶扩展了现有的 CAR 工具箱，提供了醛类高温生物合成的途径，以推动生物催化领域的新应用。
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