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Ovalbumin antibody-based fluorometric immunochromatographic lateral flow assay using CdSe/ZnS quantum dot beads as label for determination of T-2 toxin
Microchimica Acta ( IF 5.3 ) Pub Date : 2019-11-20 , DOI: 10.1007/s00604-019-3964-x Zhiwei Qie 1 , Wenliang Yan 1 , Zichen Gao 2 , Wu Meng 2 , Rui Xiao 1 , Shengqi Wang 1
Microchimica Acta ( IF 5.3 ) Pub Date : 2019-11-20 , DOI: 10.1007/s00604-019-3964-x Zhiwei Qie 1 , Wenliang Yan 1 , Zichen Gao 2 , Wu Meng 2 , Rui Xiao 1 , Shengqi Wang 1
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This work describes an anti-ovalbumin antibody-based lateral flow immunoassay (LFI) for T-2 toxin. The antibody uses a coating antigen as a bifunctional element for universality and introduces preincubation to improve the detection limits of the method. T-2 toxin and ovalbumin-modified T-2 toxin competitively binds on the anti-T-2 toxin monoclonal antibody modified on CdSe/ZnS quantum dot beads during preincubation. The modified T-2 toxin acts as a bifunctional element that forms immuno complexes during preincubation and combines with anti-ovalbumin antibody coated in the test line through the ovalbumin terminal. Fluorescence is detected at 610 nm on the test zone following photoexcitation at 365 nm. It has a reverse dose-effect relationship with the amount of T-2 toxin. The calibration plot is linear in the 20–110 fg mL−1 T-2 toxin concentration range, and the limit of detection (LOD) is 10 fg mL−1, which is lower by 8-fold than that of the traditional LFI system (LOD 80 fg mL−1) and one order of magnitude than those of LFIs with labels of colloidal gold nanoparticles (LOD 150 fg mL−1) or fluorophores (LOD 190 ng mL−1). Universality was verified through aflatoxin B1 detection using the established ovalbumin antibody-based LFI system (LOD 10 fg mL−1). The performance of the method was compared with that of established systems and a commercial ELISA kit (LOD 360 fg mL−1). Graphical abstract Schematic representation of ovalbumin antibody-based immunochromatographic lateral flow assay for T-2 toxin. Preincubation is introduced for high sensitivity. T-2- anti-ovalbumin acts as a bi-functional element for universality. CdSe/ZnS quantum dot beads act as label. Fluorometric signal is detected at 610 nm. Schematic representation of ovalbumin antibody-based immunochromatographic lateral flow assay for T-2 toxin. Preincubation is introduced for high sensitivity. T-2- anti-ovalbumin acts as a bi-functional element for universality. CdSe/ZnS quantum dot beads act as label. Fluorometric signal is detected at 610 nm.
中文翻译：
使用 CdSe/ZnS 量子点珠作为标记物测定 T-2 毒素的基于卵清蛋白抗体的荧光免疫色谱侧流测定
这项工作描述了一种用于 T-2 毒素的基于抗卵清蛋白抗体的横向流动免疫分析 (LFI)。该抗体使用包被抗原作为通用性双功能元件，并引入预孵育以提高该方法的检测限。T-2 毒素和卵清蛋白修饰的 T-2 毒素在预培养过程中与 CdSe/ZnS 量子点珠上修饰的抗 T-2 毒素单克隆抗体竞争性结合。修饰的 T-2 毒素充当双功能元件，在预孵育过程中形成免疫复合物，并通过卵清蛋白末端与检测线中包被的抗卵清蛋白抗体结合。在 365 nm 光激发后，在测试区的 610 nm 处检测到荧光。它与 T-2 毒素的量呈反向剂量效应关系。校准图在 20–110 fg mL-1 T-2 毒素浓度范围内呈线性，检测限 (LOD) 为 10 fg mL-1，比传统 LFI 系统低 8 倍(LOD 80 fg mL-1) 并且比带有胶体金纳米颗粒 (LOD 150 fg mL-1) 或荧光团 (LOD 190 ng mL-1) 标记的 LFI 高一个数量级。使用已建立的基于卵清蛋白抗体的 LFI 系统 (LOD 10 fg mL-1) 通过黄曲霉毒素 B1 检测验证了通用性。将该方法的性能与已建立的系统和商业 ELISA 试剂盒 (LOD 360 fg mL-1) 的性能进行了比较。图形摘要 基于卵清蛋白抗体的 T-2 毒素免疫层析横向流动测定的示意图。引入预培养以获得高灵敏度。T-2-抗卵清蛋白作为一种双功能元件，具有普遍性。CdSe/ZnS 量子点珠用作标记。在 610 nm 处检测到荧光信号。基于卵清蛋白抗体的 T-2 毒素免疫层析侧向流动测定的示意图。引入预培养以获得高灵敏度。T-2-抗卵清蛋白作为一种双功能元件，具有普遍性。CdSe/ZnS 量子点珠用作标记。在 610 nm 处检测到荧光信号。
更新日期：2019-11-20
中文翻译：
使用 CdSe/ZnS 量子点珠作为标记物测定 T-2 毒素的基于卵清蛋白抗体的荧光免疫色谱侧流测定
这项工作描述了一种用于 T-2 毒素的基于抗卵清蛋白抗体的横向流动免疫分析 (LFI)。该抗体使用包被抗原作为通用性双功能元件，并引入预孵育以提高该方法的检测限。T-2 毒素和卵清蛋白修饰的 T-2 毒素在预培养过程中与 CdSe/ZnS 量子点珠上修饰的抗 T-2 毒素单克隆抗体竞争性结合。修饰的 T-2 毒素充当双功能元件，在预孵育过程中形成免疫复合物，并通过卵清蛋白末端与检测线中包被的抗卵清蛋白抗体结合。在 365 nm 光激发后，在测试区的 610 nm 处检测到荧光。它与 T-2 毒素的量呈反向剂量效应关系。校准图在 20–110 fg mL-1 T-2 毒素浓度范围内呈线性，检测限 (LOD) 为 10 fg mL-1，比传统 LFI 系统低 8 倍(LOD 80 fg mL-1) 并且比带有胶体金纳米颗粒 (LOD 150 fg mL-1) 或荧光团 (LOD 190 ng mL-1) 标记的 LFI 高一个数量级。使用已建立的基于卵清蛋白抗体的 LFI 系统 (LOD 10 fg mL-1) 通过黄曲霉毒素 B1 检测验证了通用性。将该方法的性能与已建立的系统和商业 ELISA 试剂盒 (LOD 360 fg mL-1) 的性能进行了比较。图形摘要 基于卵清蛋白抗体的 T-2 毒素免疫层析横向流动测定的示意图。引入预培养以获得高灵敏度。T-2-抗卵清蛋白作为一种双功能元件，具有普遍性。CdSe/ZnS 量子点珠用作标记。在 610 nm 处检测到荧光信号。基于卵清蛋白抗体的 T-2 毒素免疫层析侧向流动测定的示意图。引入预培养以获得高灵敏度。T-2-抗卵清蛋白作为一种双功能元件，具有普遍性。CdSe/ZnS 量子点珠用作标记。在 610 nm 处检测到荧光信号。
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