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Biosynthesis of GDP-d-glycero-α-d-manno-heptose for the Capsular Polysaccharide of Campylobacter jejuni.
Biochemistry ( IF 2.9 ) Pub Date : 2019-08-26 00:00:00 , DOI: 10.1021/acs.biochem.9b00548 Jamison P Huddleston 1 , Frank M Raushel 1
Biochemistry ( IF 2.9 ) Pub Date : 2019-08-26 00:00:00 , DOI: 10.1021/acs.biochem.9b00548 Jamison P Huddleston 1 , Frank M Raushel 1
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The capsular polysaccharide (CPS) structure of Campylobacter jejuni contributes to its robust fitness. Many strains contain heptose moieties in their CPS units. The precursor heptose is GDP-d-glycero-α-d-manno-heptose; modifications to the stereochemistry at C3–C6 as well as additions of methyl and phosphoramidate groups lend to the hypervariability of the C. jejuni CPS structures. Synthesis of GDP-d-glycero-α-d-manno-heptose has been described previously, but using enzymes from Aneurinibacillus thermoaerophilus DSM 10155. Here we describe the complete synthesis of GDP-d-glycero-α-d-manno-heptose using enzymes from C. jejuni NTCC 11168: Cj1152 and Cj1423–Cj1425. Our results yield kinetic parameters for these enzymes and outline a successful strategy for milligram–gram scale synthesis of GDP-d-glycero-α-d-manno-heptose. This achievement is critical for the characterization of other carbohydrate tailoring enzymes, which are expected to utilize GDP-d-glycero-α-d-manno-heptose for the biosynthesis of more complex carbohydrates in the CPS of C. jejuni.
中文翻译：
空肠弯曲杆菌荚膜多糖的 GDP-d-甘油-α-d-甘露庚糖的生物合成。
空肠弯曲杆菌的荚膜多糖 (CPS) 结构有助于其强健的适应性。许多菌株的 CPS 单元中含有庚糖部分。前体庚糖为GDP- d-甘油-α- d-甘露-庚糖； C3-C6 立体化学的修改以及甲基和氨基磷酸酯基团的添加导致了空肠弯曲菌CPS 结构的高度可变性。 GDP- d -甘油-α- d -甘露-庚糖的合成先前已被描述，但使用来自嗜热动脉神经杆菌DSM 10155的酶。在这里，我们描述了使用来自空肠弯曲菌NTCC 11168 的酶：Cj1152 和 Cj1423–Cj1425。我们的结果得出了这些酶的动力学参数，并概述了毫克级合成 GDP- d-甘油-α- d-甘露-庚糖的成功策略。这一成就对于其他碳水化合物定制酶的表征至关重要，这些酶有望利用 GDP- d-甘油-α- d-甘露-庚糖在空肠弯曲菌的 CPS 中生物合成更复杂的碳水化合物。
更新日期：2019-08-26
中文翻译：
空肠弯曲杆菌荚膜多糖的 GDP-d-甘油-α-d-甘露庚糖的生物合成。
空肠弯曲杆菌的荚膜多糖 (CPS) 结构有助于其强健的适应性。许多菌株的 CPS 单元中含有庚糖部分。前体庚糖为GDP- d-甘油-α- d-甘露-庚糖； C3-C6 立体化学的修改以及甲基和氨基磷酸酯基团的添加导致了空肠弯曲菌CPS 结构的高度可变性。 GDP- d -甘油-α- d -甘露-庚糖的合成先前已被描述，但使用来自嗜热动脉神经杆菌DSM 10155的酶。在这里，我们描述了使用来自空肠弯曲菌NTCC 11168 的酶：Cj1152 和 Cj1423–Cj1425。我们的结果得出了这些酶的动力学参数，并概述了毫克级合成 GDP- d-甘油-α- d-甘露-庚糖的成功策略。这一成就对于其他碳水化合物定制酶的表征至关重要，这些酶有望利用 GDP- d-甘油-α- d-甘露-庚糖在空肠弯曲菌的 CPS 中生物合成更复杂的碳水化合物。
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