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强制嵌入 (FIT)-适体
Journal of the American Chemical Society ( IF 14.4 ) Pub Date : 2019-08-23 , DOI: 10.1021/jacs.9b06450
Sasha B. Ebrahimi , Devleena Samanta , Ho Fung Cheng , Levy I. Nathan , Chad A. Mirkin
Journal of the American Chemical Society ( IF 14.4 ) Pub Date : 2019-08-23 , DOI: 10.1021/jacs.9b06450
Sasha B. Ebrahimi , Devleena Samanta , Ho Fung Cheng , Levy I. Nathan , Chad A. Mirkin
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适体是寡核苷酸序列,可以进化为与各种感兴趣的分析物结合。在这里,我们提出了一种通用设计策略,通过使用粘度敏感染料将适体-目标结合事件转换为荧光读数。与适体结合的靶标导致寡核苷酸碱基对之间染料的强制嵌入 (FIT),使其荧光增加多达 20 倍。具体而言,我们证明 FIT 适配体可以通过分子内构象变化、夹心分析和分离适配体的目标模板重新关联来报告目标的存在,表明最常见的适配体-目标结合模式可以与基于 FIT 的读数耦合。该策略还可用于检测双链内金属碱基对的形成,因此对于筛选金属介导的碱基配对事件具有吸引力。重要的是,FIT 适配体减少了通常与基于荧光团淬灭剂的系统相关的假阳性信号,通过提供高达 15 倍的信号背景比在定量上优于基于 FRET 的探针,并允许快速和高度灵敏的目标检测(纳摩尔范围)在人血清等复杂培养基中。综上所述,FIT 适配体是一类新的信号适配体,它包含一个单一的修饰,但可用于检测范围广泛的目标。通过提供高达 15 倍的信号与背景比,定量优于基于 FRET 的探针,并允许在复杂介质(如人血清)中进行快速和高灵敏度的目标检测(纳摩尔范围)。综上所述,FIT 适配体是一类新的信号适配体,它包含一个单一的修饰,但可用于检测范围广泛的目标。通过提供高达 15 倍的信号背景比,定量优于基于 FRET 的探针,并允许在复杂介质(如人血清)中进行快速和高灵敏度的目标检测(纳摩尔范围)。综上所述,FIT 适配体是一类新的信号适配体,它包含一个单一的修饰,但可用于检测范围广泛的目标。
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更新日期:2019-08-23

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