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从 ε-脱氨基 L-赖氨酸脱氢酶生成具有更高催化性能和底物范围的胺脱氢酶。
Nature Communications ( IF 14.7 ) Pub Date : 2019-08-16 , DOI: 10.1038/s41467-019-11509-x
Vasilis Tseliou 1 , Tanja Knaus 1 , Marcelo F Masman 1 , Maria L Corrado 1 , Francesco G Mutti 1
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胺脱氢酶 (AmDH) 催化酮转化为对映体纯胺,仅消耗氨和氢化物源。在计算模型的结构信息的指导下,我们创建了 AmDH,它可以转化药学相关的芳香酮,并达到定量和完美的化学和光学纯度。这些 AmDH 是由非常规酶支架产生的,该支架显然在其自然反应中不进行任何不对称转化。此外,最佳变体 (LE-AmDH-v1) 显示出独特的底物依赖性对映选择性开关,提供对映体过量高达 >99.9% 的 S-或 R-构型胺产品。这些发现通过计算机研究进行了解释。LE-AmDH-v1 具有高度热稳定性(Tm 为 69 °C),在高达 50 °C 的温度下孵育几天后几乎完全保留其催化活性,并且优先在 50 °C 和 pH 9.0 下运行。这项研究还表明,产物抑制可能是 AmDH 催化还原胺化的关键因素。



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更新日期:2019-08-16
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