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通过单分子计数分析分离的和聚集的DNA损伤。
Analytical Chemistry ( IF 6.7 ) Pub Date : 2019-07-31 00:00:00 , DOI: 10.1021/acs.analchem.9b02694
Yan Zhang 1 , Ruo-Nan Hua 1 , Chun-Yang Zhang 1
Analytical Chemistry ( IF 6.7 ) Pub Date : 2019-07-31 00:00:00 , DOI: 10.1021/acs.analchem.9b02694
Yan Zhang 1 , Ruo-Nan Hua 1 , Chun-Yang Zhang 1
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DNA损伤严重威胁基因组稳定性，并与诱变，致癌作用和细胞死亡有关。DNA损伤包括孤立的损伤和聚集的损伤，但是由于其空间分布，很少有方法可用于有效检测聚集的损伤。在本文中，我们提出了一种单分子计数方法，具有检测基因组DNA中孤立的和聚类的损伤的能力。我们采用修复酶去除DNA损伤，并使用末端脱氧核苷酸转移酶（TdT）以独立于模板的方式将生物素化的核苷酸和荧光核苷酸掺入损伤位点。在用150μMH 2 O 2处理的单个HeLa细胞中，总的氧化损伤碱基的数量估计为7328-7406。这种方法与特殊的修复酶结合可以检测不同类型细胞中的各种DNA损伤，为与DNA损伤相关的人类疾病的早期诊断具有巨大的潜力。
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更新日期：2019-07-31
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