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pH影响吸附到金纳米颗粒上的抗体的方向。
Bioconjugate Chemistry ( IF 4.0 ) Pub Date : 2019-03-19 , DOI: 10.1021/acs.bioconjchem.9b00123 Guadalupe Ruiz 1 , Kiran Tripathi 1 , Samuel Okyem 1 , Jeremy D Driskell 1
Bioconjugate Chemistry ( IF 4.0 ) Pub Date : 2019-03-19 , DOI: 10.1021/acs.bioconjchem.9b00123 Guadalupe Ruiz 1 , Kiran Tripathi 1 , Samuel Okyem 1 , Jeremy D Driskell 1
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利用金纳米颗粒（AuNPs）独特特性的新型检测策略为诊断测试的发展带来了广阔前景。这些启用纳米粒子技术中许多技术的基础是将抗体固定在AuNP表面上，以提供与靶标物种的选择性结合。固定抗体的方向和负载密度决定了Fab的可及性，并且对分析性能至关重要。在这里，我们使用pH值来系统地控制抗体表面电荷的分布，并研究蛋白质电荷对AuNPs吸附的影响。纳米颗粒跟踪分析（NTA）用于测量不同pH下抗辣根过氧化物酶抗体（anti-HRP）在AuNPs上的吸附动力学。NTA通过测量AuNPs的流体动力学直径（DH）随抗体浓度的变化而增加，从而能够原位测量抗体在AuNP上的吸附。从每个吸附等温线与希尔修改的Langmuir方程的最佳拟合中提取每个pH上的吸附亲和力，蛋白质层厚度和结合合作性。我们的数据表明，在pH值7.5、8.0和8.5饱和时会形成单层抗体，在此pH值范围（Kd〜11 nM）下，未观察到抗HRP-AuNP结合常数的差异。但是，在单层覆盖下吸附有蛋白质的AuNPs的DH的增加是pH依赖性的，对于pH值7.5、8.0和8.5，分别为13.2±1.1 nm，9.8±1.0 nm和7.4±0.6 nm。而且，酶介导分析的结果表明，固定的抗HRP抗体在pH值7.5、8.0和8.5吸附时的抗原结合能力分别为33±2％，23±7％和18±2％。我们的数据证实，可以通过pH改变抗体电荷，从而调节和优化AuNP上的抗体方向。这些研究描述了我们继续努力建立设计标准，以制备具有最大抗原结合活性的结合物，该结合物将增强生物功能纳米材料的性能。
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更新日期：2019-03-07
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