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Cas9和Cas12a的RNA非依赖性DNA切割活性。
Cell Reports ( IF 7.5 ) Pub Date : 2017-12-26 , DOI: 10.1016/j.celrep.2017.11.100 Ramya Sundaresan , Hari Priya Parameshwaran , S.D. Yogesha , Mark Walter Keilbarth , Rakhi Rajan
Cell Reports ( IF 7.5 ) Pub Date : 2017-12-26 , DOI: 10.1016/j.celrep.2017.11.100 Ramya Sundaresan , Hari Priya Parameshwaran , S.D. Yogesha , Mark Walter Keilbarth , Rakhi Rajan
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CRISPR-Cas系统为细菌和古细菌提供了序列特异性保护，以防其侵入移动遗传元素。在存在二价金属离子的情况下，Cas9和Cas12a（以前称为Cpf1）蛋白靶向并切割与同源引导RNA互补的DNA。Cas9和Cas12a识别靶DNA中的原间隔子相邻基序（PAM）序列对于切割至关重要。这种RNA引导的DNA靶向被广泛用于基因编辑方法。在这里，我们显示了弗朗西斯菌tularensis novicida（Fno）Cas12a，FnoCas9和化脓性链球菌Cas9（SpyCas9）在存在Mn 2+的情况下切割DNA而没有向导RNA离子。不依赖RNA的活性对底物的要求各不相同。FnoCas9优先刻痕双链质粒，SpyCas9降解单链质粒，FnoCas12a切割两个底物。这些观察结果表明，胞内金属的身份和水平以及所采用的Cas9 / Cas12a直系同源物可能对基因组编辑应用产生重大影响。
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更新日期：2017-12-27
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