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Neu5Acα2-3Galβ1-3GalNAc 三糖结构特异性猪 α2,3-Gal-β1,3-GalNAc-α2,6-唾液酸转移酶 (pST6GalNAc IV) 基因的分子表征
Glycoconjugate Journal ( IF 2.7 ) Pub Date : 2010-03-22 , DOI: 10.1007/s10719-010-9284-3
Hyun-Kwon Ko 1 , Kwon-Ho Song , Un-Ho Jin , Hwan-Hoo Seong , Young-Chae Chang , Nam-Hyung Kim , Dong-Soo Kim , Young-Choon Lee , Cheorl-Ho Kim
Affiliation  

糖缀合物的唾液酸在各种生物过程中起着至关重要的作用,例如细胞-细胞通讯和细胞-底物相互作用。一种水杨酸转移酶 ST6GalNAc IV(Neu5Ac-α2,3-Gal-β1,3-GalNAc-α2,6-唾液酸转移酶)催化 α2-6-连接到蛋白质的 O-糖苷连接的 Ser/Thr 的 GalNAc 残基上的形成。在这项研究中,我们克隆了猪 ST6GalNAc IV (pST6GalNAc IV) 并研究了其功能表征。pST6GalNAc IV cDNA 已从猪肝组织中分离出来,它包含一个完整的开放阅读框(ORF,906 bp),编码 302 个氨基酸残基。pST6GalNAc IV 的整个 ORF 包含唾液酸基序 'L'-(大)、'S'-(小)和 '-VS'(非常小)与智人(90%)、Pan troglodytes具有高度的序列相似性(91%) 和Mus musculus (87%)。pST6GalNAc IV mRNA 在各种猪组织中的表达通过逆转录聚合酶链反应 (RT-PCR) 分析进行鉴定。pST6GalNAc IV mRNA 在舌、肌肉和心脏中高度表达,而在胰腺中不表达。为了对猪肾 PK15 细胞中 pST6GalNAc IV 基因的功能表征,我们还建立了 pST6GalNAc IV 转染的 PK15 细胞,该细胞稳定表达 pST6GalNAc IV 基因。通过流式细胞术并用免疫荧光分析检测pST6GalNAc IV转染的PK15细胞的糖基化模式山槐凝集素(MAA),山槐血凝素(MAL II),西洋接骨木凝集素(SNA)和花生凝集素(PNA)凝集素。被MAL-II和SNA识别的Neu5Acα2-3Galβ1-3(Neu5Acα2-6)GalNAc四糖或Neu5Acα2-6GalNAc二糖的特定碳水化合物结构被揭示是由pST6GalNAc IV新合成的。结果表明,猪pST6GalNAc IV基因能够在O-糖蛋白上合成Neu5Acα2-3Galβ1-3(Neu5Acα2-6)GalNAc四糖结构。



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更新日期:2010-03-22
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