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受控曝光显微镜可减少荧光活细胞成像中的光漂白和光毒性。
Nature Biotechnology ( IF 33.1 ) Pub Date : 2007 Feb , DOI: 10.1038/nbt1278
R A Hoebe 1 , C H Van Oven , T W J Gadella , P B Dhonukshe , C J F Van Noorden , E M M Manders
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活细胞的荧光显微镜可以使细胞内分子的动力学和相互作用可视化。然而，荧光活细胞成像受到激发光引起的光漂白和光毒性的限制。在这里，我们描述了受控曝光显微镜（CLEM），这是一种简单的成像方法，可以将光漂白和光毒性降低两倍到十倍，具体取决于物体中的荧光团分布。通过空间控制曝光时间，CLEM 可以在不影响图像质量的情况下减少激发光剂量。我们发现，在表达微管相关 GFP-MAP4 的烟草植物细胞中，CLEM 使光漂白减少了七倍，在表达染色质相关 H2B-GFP 的 HeLa 细胞中，活性氧的产生减少了八倍，细胞存活时间延长了六倍。此外，CLEM 将荧光强度的动态范围增加至少两倍。
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