过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARgamma）是多种疾病的重要治疗药物靶标，包括糖尿病，炎症，血脂异常，高血压和癌症。已显示，PPARγ的拮抗剂或部分激动剂在发现新型抗糖尿病药方面具有诱人的潜在应用，这些新型抗糖尿病药可以保留有效的胰岛素敏化特性并使潜在的副作用降至最低。在这项工作中，发现二肽H-Trp-Glu-OH（G3335）是新型的PPARgamma拮抗剂。Biacore 3000基于表面等离振子共振（SPR）技术的结果表明，G3335对PPARgamma表现出高度特异性的结合亲和力（K（D）= 8.34 microM），并且能够阻断罗格列酮（一种有效的PPARgamma激动剂），在刺激PPARγ配体结合域（LBD）和RXRalpha-LBD之间的相互作用。酵母两杂交试验表明，在促进PPARgamma-LBD-CBP相互作用时，G3335在干扰罗格列酮方面表现出强大的拮抗活性（IC50 = 8.67 microM）。此外，在反式激活试验中，G3335被进一步确认为PPARgamma的拮抗剂，因为G3335可以与PPARgamma竞争性结合0.1 microM罗格列酮，从而抑制报告基因的表达，IC50值为31.9μM。此外，进行了同源性建模和分子对接分析，以研究PPARgamma-LBD与G3335在原子水平上的结合模式。结果表明，PPARgamma中的残基Cys285，Arg288，Ser289和His449在PPARgamma-LBD-G3335结合中起着至关重要的作用。Cys285对PPARgamma-LBD-G3335相互作用的重要性进一步通过PPARgamma点突变（PPARgamma-LBD-Cys285Ala）证明。希望我们目前的工作将为发现PPARgamma拮抗剂提供有力的方法，并且有望将G3335开发为糖尿病研究中可能的先导化合物。



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