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Blebbistatin抑制平滑肌肌球蛋白和非肌肉肌球蛋白2的表征
Biochemistry ( IF 2.9 ) Pub Date : 2017-08-01 00:00:00 , DOI: 10.1021/acs.biochem.7b00311
Hai-Man Zhang 1, 2 , Huan-Hong Ji 1 , Tong Ni 1, 2 , Rong-Na Ma 1 , Aibing Wang 3 , Xiang-dong Li 1, 2
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Blebbistatin是II类肌球蛋白(包括横纹肌肌球蛋白和非肌肉肌球蛋白2(NM2))运动功能的有效和特异性抑制剂。但是,尚未评估blebbistatin对NM2c的抑制作用,并且就其与NM2高度同源的平滑肌肌球蛋白(SmM)的功效而言,仍存在争议。为了弄清这些问题,我们分析了blebbistatin对重组SmM和三个NM2(NM2a,-2b和-2c)运动活性的影响。我们发现blebbistatin可以有效抑制SmM和NM2s的肌动蛋白激活的ATPase活性,其IC 50如下:值:SmM为6.47μM,NM2a为3.58μM,NM2b为2.30μM,NM2c为1.57μM。为了鉴定抗blebistatin的肌球蛋白2突变体,我们对SmM和NM2s的blebbistatin结合位点中的保守残基进行了诱变分析。我们发现,A456F突变使SmM和NM2s对blebbistatin产生抗性,而没有极大地改变它们的运动活性或磷酸化依赖性调节,使A456F成为研究NM2s细胞功能的有用突变体。



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更新日期:2017-08-02
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