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Cas13a 引导 RNA 切割的分子结构。
Cell ( IF 45.5 ) Pub Date : 2017-Aug-10 , DOI: 10.1016/j.cell.2017.06.050 Liang Liu 1 , Xueyan Li 2 , Jun Ma 3 , Zongqiang Li 1 , Lilan You 2 , Jiuyu Wang 1 , Min Wang 1 , Xinzheng Zhang 4 , Yanli Wang 5
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Cas13a 是一种 VI-A 型 CRISPR-Cas RNA 引导的 RNA 核糖核酸酶，可降解 CRISPR RNA (crRNA) 靶向的侵入性 RNA，在 RNA 技术中具有潜在应用。为了了解 Cas13a 如何被激活以切割 RNA，我们确定了与 crRNA 结合的颊纤毛菌 (Lbu) Cas13a 及其靶 RNA 的晶体结构，以及 LbuCas13a-crRNA 复合物的冷冻电镜结构。 crRNA-靶标 RNA 双链体结合在核酸酶 (NUC) 叶带正电荷的中央通道中，Cas13a 蛋白和 crRNA 在靶标 RNA 结合后经历显着的构象变化。引导-靶标RNA双链体的形成触发HEPN1结构域向HEPN2结构域移动，激活Cas13a蛋白的HEPN催化位点，随后以非特异性方式切割单链靶标和侧链RNA。这些发现揭示了 VI 型 CRISPR-Cas 系统的 Cas13a 如何防御 RNA 噬菌体，并为其发展为 RNA 操作工具奠定了基础。
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