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使用CRISPR-Cas9对有毒乳酸球菌噬菌体进行基因组工程
ACS Synthetic Biology ( IF 3.7 ) Pub Date : 2017-03-30 00:00:00 , DOI: 10.1021/acssynbio.6b00388 Marie-Laurence Lemay 1 , Denise M. Tremblay 1 , Sylvain Moineau 1
ACS Synthetic Biology ( IF 3.7 ) Pub Date : 2017-03-30 00:00:00 , DOI: 10.1021/acssynbio.6b00388 Marie-Laurence Lemay 1 , Denise M. Tremblay 1 , Sylvain Moineau 1
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噬菌体是在每个生态系统中发现的生物实体。尽管在过去的几十年中已经学到了很多知识，但是仍然存在巨大的知识空白。操纵有毒的噬菌体基因组具有挑战性。迄今为止，还没有有效的基因编辑工具可用于工程设计有毒的乳球菌噬菌体。乳酸乳球菌是在各种牛奶发酵过程中广泛用作发酵剂的细菌，其噬菌体敏感性对奶酪行业构成了持续的风险。乳球菌噬菌体p2是这些有毒噬菌体研究最好的模型之一。尽管它很重要，但几乎有一半的基因没有功能分配。源自自然原核防御机制的CRISPR-Cas9基因组编辑技术为噬菌体研究提供了新的策略。在这里，知名化脓性链球菌CRISPR-Cas9被用于异源宿主中以修饰严格裂解噬菌体的基因组。在原型噬菌体敏感宿主乳酸乳球菌MG1363中实施我们经过改造的CRISPR-Cas9工具，使我们能够修饰噬菌体p2的基因组。描述了一种简单，可重现的技术，该技术可产生精确的突变，从而允许在体内研究裂解噬菌体基因及其编码的蛋白质。
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更新日期：2017-03-30
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