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Drosha介导的sgRNA-shRNA结构增强了基于CRISPR / Cas9的多重基因组工程。
Scientific Reports ( IF 3.8 ) Pub Date : 2016-12-12 , DOI: 10.1038/srep38970 Qiang Yan , Kun Xu , Jiani Xing , Tingting Zhang , Xin Wang , Zehui Wei , Chonghua Ren , Zhongtian Liu , Simin Shao , Zhiying Zhang
Scientific Reports ( IF 3.8 ) Pub Date : 2016-12-12 , DOI: 10.1038/srep38970 Qiang Yan , Kun Xu , Jiani Xing , Tingting Zhang , Xin Wang , Zehui Wei , Chonghua Ren , Zhongtian Liu , Simin Shao , Zhiying Zhang
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簇状规则间隔的短回文重复序列（CRISPR）系统最近已发展成为一种强大的基因组编辑技术，因为它仅需要两个关键成分（Cas9蛋白和sgRNA）即可发挥功能，并进一步实现了多重基因组靶向和同源性定向修复（基于HDR）的精确基因组编辑，适用于多种生物。在这里，我们报告通过使用Drosha介导的sgRNA-shRNA结构来指导Cas9进行多重基因组靶向和精确的基因组编辑的新颖有趣的策略。对于多重基因组靶向测定，我们在嘌呤霉素选择的细胞克隆中的3个基因组位点实现了9％以上的同时突变效率。通过将针对DNA连接酶IV基因（LIG4）的shRNA导入sgRNA-shRNA构建体，基于HDR的精确基因组编辑效率提高了2倍以上。我们的工作为哺乳动物细胞中多重和精确的基因组修饰提供了有用的工具。
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更新日期：2016-12-13
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