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完整的四糖重复单元生物合成的脆弱免疫性拟杆菌（Bacteroides fragilis）荚膜多糖A
ACS Chemical Biology ( IF 3.5 ) Pub Date : 2016-11-28 00:00:00 , DOI: 10.1021/acschembio.6b00931 Sunita Sharma 1 , Katelyn M. Erickson 1 , Jerry M. Troutman 1
ACS Chemical Biology ( IF 3.5 ) Pub Date : 2016-11-28 00:00:00 , DOI: 10.1021/acschembio.6b00931 Sunita Sharma 1 , Katelyn M. Erickson 1 , Jerry M. Troutman 1
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荚膜多糖A（CPSA）是在肠道共生菌脆弱拟杆菌（Bacteroides fragilis）表面上发现的四糖重复单元聚合物在自身免疫性疾病的动物模型中具有治疗潜力。这种治疗潜力归因于其两性离子特性，该特性来自带正电的N-乙酰基-4-氨基半乳糖胺（AADGal）和带负电的4,6-O-丙酮酸半乳糖（PyrGal）。在此报告中，使用荧光聚异戊二烯化学探针，可实现CPSA四糖重复单元的完整酶促组装。拟议的丙酮基转移酶WcfO；吡喃半乳糖突变酶，WcfM；CPSA生物合成基因簇编码的糖基转移酶WcfP和WcfN被异源表达并进行功能表征。发现WcfO催化的丙酮酸修饰发生在聚异戊二烯连接的二糖（AADGal-Gal）的半乳糖上，不会发生在与尿苷二磷酸（UDP）连接的半乳糖或一组硝基苯基-半乳糖类似物中。还发现这种丙酮酸修饰是通过糖基转移酶WcfP将下一个糖掺入N-乙酰半乳糖胺（GalNAc）途径中所必需的。半乳糖的丙酮酸缩醛修饰以前没有在多糖生物合成途径的背景下进行过研究，这项工作证明了这种修饰对于重复单元组装的重要性。生产聚异戊二烯连接的AADGal-PyrGal-GalNAc后，发现蛋白质WcfM和WcfN协同作用形成最终的四糖，其中WcfM形成UDP-半乳糖呋喃糖（Gal 还发现这种丙酮酸修饰是通过糖基转移酶WcfP将下一个糖掺入N-乙酰半乳糖胺（GalNAc）途径中所必需的。半乳糖的丙酮酸缩醛修饰以前没有在多糖生物合成途径的背景下进行过研究，这项工作证明了这种修饰对于重复单元组装的重要性。生产聚异戊二烯连接的AADGal-PyrGal-GalNAc后，发现蛋白质WcfM和WcfN协同作用形成最终的四糖，其中WcfM形成UDP-半乳糖呋喃糖（Gal 还发现这种丙酮酸修饰是通过糖基转移酶WcfP将下一个糖掺入N-乙酰半乳糖胺（GalNAc）途径中所必需的。半乳糖的丙酮酸缩醛修饰以前没有在多糖生物合成途径的背景下进行过研究，这项工作证明了这种修饰对于重复单元组装的重要性。生产聚异戊二烯连接的AADGal-PyrGal-GalNAc后，发现蛋白质WcfM和WcfN协同作用形成最终的四糖，其中WcfM形成UDP-半乳糖呋喃糖（Gal 这项工作证明了此修改对于重复单元组装的重要性。生产聚异戊二烯连接的AADGal-PyrGal-GalNAc后，发现蛋白质WcfM和WcfN协同作用形成最终的四糖，其中WcfM形成UDP-半乳糖呋喃糖（Gal 这项工作证明了此修改对于重复单元组装的重要性。生产聚异戊二烯连接的AADGal-PyrGal-GalNAc后，发现蛋白质WcfM和WcfN协同作用形成最终的四糖，其中WcfM形成UDP-半乳糖呋喃糖（Galf），WcfN将Gal f转移到AADGal-PyrGal-GalNAc。这项工作证明了CPSA四糖重复单元在顺序单罐反应中的第一个酶促组装。
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更新日期：2016-11-28
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