Glioblastoma (GB), the most aggressive tumor of the central nervous system (CNS), has poor patient outcomes with limited effective treatments available. MicroRNA-21 (miR-21(a)) is a known oncogene, abundantly expressed in many cancer types. miR-21(a) promotes GB progression, and lack of miR-21(a) reduces the tumorigenic potential. Here, we propose a single adeno-associated virus (AAV) vector strategy targeting mmu-miR-21a using the Staphylococcus aureus Cas9 ortholog (SaCas9) guided by a single-guide RNA (sgRNA). Our results demonstrate that AAV8 is a well-suited AAV serotype to express SaCas9-KKH/sgRNA at the tumor site in an orthotopic GB model. The SaCas9-KKH induced a genomic deletion, resulting in lowered mmu-miR-21a levels in the brain, leading to reduced tumor growth and improved overall survival. In this study, we demonstrated that disruption of genomic mmu-miR-21a with a single AAV vector influenced glioma development, resulting in beneficial anti-tumor outcomes in GB-bearing mice.

中文翻译：

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通过单个腺相关病毒载体靶向 mmu-miR-21a 的 CRISPR 可延长携带胶质母细胞瘤的小鼠的存活时间


胶质母细胞瘤 （GB） 是中枢神经系统 （CNS） 最具侵袭性的肿瘤，患者预后不佳，可用的有效治疗方法有限。MicroRNA-21 （miR-21（a）） 是一种已知的癌基因，在许多癌症类型中大量表达。miR-21（a） 促进 GB 进展，缺乏 miR-21（a） 降低致瘤潜力。在这里，我们提出了一种靶向 mmu-miR-21a 的腺相关病毒 （AAV） 载体策略，使用由单向导 RNA （sgRNA） 引导的金黄色葡萄球菌 Cas9 直系同源物 （SaCas9）。我们的结果表明，AAV8 是一种非常适合在原位 GB 模型中在肿瘤部位表达 SaCas9-KKH/sgRNA 的 AAV 血清型。SaCas9-KKH 诱导基因组缺失，导致大脑中 mmu-miR-21a 水平降低，导致肿瘤生长减少并提高总生存期。在这项研究中，我们证明了用单个 AAV 载体破坏基因组 mmu-miR-21a 会影响神经胶质瘤的发展，从而在携带 GB 的小鼠中产生有益的抗肿瘤结果。