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Cas9-PE：一种强大的多重基因编辑工具，用于水稻同时进行精确编辑和位点特异性随机突变
Trends in Biotechnology ( IF 14.3 ) Pub Date : 2024-11-12 , DOI: 10.1016/j.tibtech.2024.10.012
Jinpeng Zou 1 , Xiangbing Meng 2 , Zhengyuan Hong 3 , Yuchun Rao 4 , Kejian Wang 5 , Jiayang Li 6 , Hong Yu 6 , Chun Wang 1
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在分子设计育种中，通过特异性核苷酸修饰同时引入所需的功能基因和消除调节不需要的表型性状或农艺成分的基因需要先进的基因编辑工具。由于编辑效率有限，即使使用高精度编辑工具，如引物编辑 （PE），同时编辑多种突变类型也是一项挑战。在这里，我们用 Cas9 取代 Cas9 切口酶 （nCas9），在水稻中构建 Cas9 介导的 PE （Cas9-PE） 系统。该系统不仅可以进行精确编辑，还可以进行位点特异性随机突变。此外，利用 Cas9-PE 的精确性，我们使用共编辑策略建立了无转基因多重基因编辑系统。该策略涉及农杆菌介导的精确编辑水稻内源乙酰乳酸合酶基因的瞬时表达ALSS627I赋予除草剂双吡草酸钠 （BS） 抗性作为选择标志。本研究为分子设计育种提供了一种通用高效的多重基因编辑工具。
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