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杂交链式反应和蛋白质结合扩增的整合用于细胞内 mRNA 的长期成像:避免信号波动

Analytical Chemistry ( IF 6.7 ) Pub Date : 2024-06-26 , DOI: 10.1021/acs.analchem.4c01992
Yibo Zhou 1 , Huiqiu Shi 1 , Xinchao Xia 1 , Sheng Yang 2 , Junbin Li 1 , Zhihe Qing 1 , Jing Zheng 3 , Ronghua Yang 2
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基于杂交链式反应 (HCR) 的放大纳米探针已被广泛开发用于检测细胞内低丰度 mRNA。然而,形成的荧光团修饰的链状组装体会被内源酶快速降解,导致长期荧光成像失败。为了解决这个问题,本文提出了一种将 HCR 整合到蛋白质结合信号放大 (HPSA) 中的复合信号放大策略,通过避免信号波动来进行 mRNA 的原位成像。与传统的基于HCR的纳米探针(HCR-nanoprobe)不同,采用HCR作为信号触发模式,通过细胞内荧光团-蛋白原位结合产生放大信号,可以长时间保持信号的高度稳定性。作为原理验证,构建了基于 HPSA 的纳米信标(HPSA-nanobeacon)来检测 TK1 mRNA。利用双信号放大模式,灵敏检测HepG2细胞内源TK1 mRNA,荧光信号维持8小时以上。这项工作的尝试为当前高稳定性传感核酸靶标的信号放大策略提供了新的选择,显着增强了细胞内分子信息的获取




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更新日期:2024-06-26
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