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光调制蓝色荧光蛋白
Journal of the American Chemical Society ( IF 14.4 ) Pub Date : 2013-10-25 , DOI: 10.1021/ja405459b
Amy E Jablonski 1 , Russell B Vegh , Jung-Cheng Hsiang , Bettina Bommarius , Yen-Cheng Chen , Kyril M Solntsev , Andreas S Bommarius , Laren M Tolbert , Robert M Dickson
Journal of the American Chemical Society ( IF 14.4 ) Pub Date : 2013-10-25 , DOI: 10.1021/ja405459b
Amy E Jablonski 1 , Russell B Vegh , Jung-Cheng Hsiang , Bettina Bommarius , Yen-Cheng Chen , Kyril M Solntsev , Andreas S Bommarius , Laren M Tolbert , Robert M Dickson
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蓝色荧光蛋白 (BFP) 提供蛋白质位置和行为的可视化,但通常会受到高自发荧光背景和信号辨别力差的影响。通过亮态和光致暗态的双激光激发,BFP 发色团周围残基的突变使 BFP 发射的长波长光学调制成为可能。这种暗态工程能够在较低能量的绿色线圈照明下增加紫色激发的蓝色发射。以特定频率打开和关闭此绿色线圈照明可动态调节收集的蓝色荧光,而不会产生额外的背景。解释为中性顺式和阴离子反式发色团形式之间的瞬时光转换,突变调整光异构化和基态互变异构化,以实现毫秒寿命、光谱移位的暗态的长波长减少。基于酪氨酸的蓝色荧光蛋白 T203V/S205V 的单突变表现出增强的调制深度和不同的频率。重要的是,不可调节的 BFP mKalama1 中的类似单点突变会产生可调节的变体。构建可调制的 BFP 为改进 BFP 信号与背景的区分提供了机会,大大提高了它们的效用。
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更新日期:2013-10-25
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