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通过杂交链式反应触发荧光纳米簇形成后放大 Cas12a 激活,用于超灵敏核酸检测

ACS Applied Materials & Interfaces ( IF 8.3 ) Pub Date : 2024-02-14 , DOI: 10.1021/acsami.3c18732
Runlin Yang 1 , Siying Xie 2, 3 , Bin Zhou 1 , Mingming Guo 1 , Jun Fan 1 , Fengli Su 2 , Zhirun Ji 2 , Yue Chen 4 , Bingzhi Li 2
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基于CRISPR/Cas12a的生物传感正在迅速发展;然而,实现 Cas12a 激活的灵敏且经济有效的报告仍然是一个挑战。为此,我们开发了一种无标记系统,能够通过整合杂交链式反应 (HCR) 和 DNA-铜纳米簇 (DNA-CuNC) 来后放大 Cas12a 激活。 Cas12a 的反式切割会触发沉默的 HCR,导致荧光 DNA-CuNC 的原位组装,从而开启 Cas12a 激活的报告。无需预扩增,该检测即可检测 DNA,检测限为 5 fM。此外,当与预扩增相结合时,该系统实现了卓越的灵敏度,可检测人血清中 1 个拷贝的猴痘病毒 (MPXV) 质粒。在基于 MPXV 假病毒的验证测试中,获得的结果与 qPCR 获得的结果一致,增强了该方法的稳健性。我们的研究代表了首次尝试操纵 HCR 上的 DNA-CuNC 形成,以实现高度灵敏且经济高效的 Cas12a 报告,从而为生物安全应用提供高效的合成生物学传感平台。




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更新日期:2024-02-14
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