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用于全面 RBP-RNA 相互作用组研究的扩展 RNA 碱基编辑器调色板
Nature Communications ( IF 14.7 ) Pub Date : 2024-01-29 , DOI: 10.1038/s41467-024-45009-4
Hugo C Medina-Munoz 1, 2, 3 , Eric Kofman 1, 2, 3, 4 , Pratibha Jagannatha 1, 2, 3, 4 , Evan A Boyle 1, 2, 3 , Tao Yu 1, 2, 3 , Krysten L Jones 1, 2, 3 , Jasmine R Mueller 1, 2, 3 , Grace D Lykins 1, 2, 3 , Andrew T Doudna 1, 2, 3 , Samuel S Park 1, 2, 3 , Steven M Blue 1, 2, 3 , Brodie L Ranzau 5 , Rahul M Kohli 6, 7 , Alexis C Komor 5 , Gene W Yeo 1, 2, 3, 4
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RNA 结合蛋白 (RBP) 是 RNA 加工和细胞功能的关键调节因子。发现 RBP 的 RNA 靶标的技术,如 TRIBE(通过编辑鉴定的 RNA 结合蛋白的靶标)和 STAMP(通过APOBEC1介导的分析来调查靶标)利用 RNA 碱基编辑器 (rBE) 与 RBP 的融合来规避基于免疫沉淀 (CLIP) 的方法的局限性,这些方法需要酶消化和大量输入材料。为了拓宽适用于基于编辑的 RBP-RNA 相互作用研究的 rBE 库,我们在一个名为 PRINTER 的框架中设计了实验和计算测定(protein-R NA 在基于对编辑 RNA 的 e nzymes 的 triaging 中)来评估 30 多个 A-to-I 和 C-to-U rBEs,使我们能够识别扩展序列特异性和广泛结合 RBP 的结合模式表征的 rBEs。我们还提出了适用于双 RBP 应用的特定 rBE。我们表明,在单个或多个 rBE 与给定的 RBP 或一对 RBP 融合之间的选择取决于 rBE 的编辑偏差和 RBP 本身的结合偏好。我们相信我们的研究简化并增强了用于下一代 RBP-RNA 靶标发现的 rBE 选择。

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