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用于全面 RBP-RNA 相互作用组研究的扩展 RNA 碱基编辑器选项

Nature Communications ( IF 14.7 ) Pub Date : 2024-01-29 , DOI: 10.1038/s41467-024-45009-4
Hugo C Medina-Munoz 1, 2, 3 , Eric Kofman 1, 2, 3, 4 , Pratibha Jagannatha 1, 2, 3, 4 , Evan A Boyle 1, 2, 3 , Tao Yu 1, 2, 3 , Krysten L Jones 1, 2, 3 , Jasmine R Mueller 1, 2, 3 , Grace D Lykins 1, 2, 3 , Andrew T Doudna 1, 2, 3 , Samuel S Park 1, 2, 3 , Steven M Blue 1, 2, 3 , Brodie L Ranzau 5 , Rahul M Kohli 6, 7 , Alexis C Komor 5 , Gene W Yeo 1, 2, 3, 4
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RNA 结合蛋白 (RBP) 是 RNA 加工和细胞功能的关键调节因子。发现 RBP 的 RNA 靶标的技术,例如 TRIBE(通过编辑识别的 RNA 结合蛋白的靶标)和 STAMP(通过 APOBEC1 介导的分析来调查靶标),利用 RNA 碱基编辑器 (rBE) 与 RBP 的融合来规避免疫沉淀的局限性 (CLIP) )为基础的方法,需要酶消化和大量的输入材料。为了扩大适合基于编辑的 RBP-RNA 相互作用研究的 rBE 库,我们在称为 PRINTER(基于蛋白质-RNA相互作用的编辑RNA分类)的框架中设计了实验和计算测定法,以评估超过 30 个 A-to-I 和 C-to-U rBE,使我们能够鉴定可扩展序列特异性和广泛结合 RBP 结合模式特征的 rBE。我们还提出了适合双 RBP 应用的特定 rBE。我们表明,选择单个或多个 rBE 与给定的 RBP 或一对 RBP 融合取决于 rBE 的编辑偏差和 RBP 本身的结合偏好。我们相信我们的研究简化并增强了 rBE 的选择,用于下一代 RBP-RNA 靶点发现。





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更新日期:2024-01-29
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