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通过工程化的 AsCas12f1 系统对小鼠进行靶向诱变

Cellular and Molecular Life Sciences ( IF 6.2 ) Pub Date : 2024-01-28 , DOI: 10.1007/s00018-023-05100-3
Peng Fan 1 , Hejun Wang 1 , Feiyu Zhao 1 , Tao Zhang 1 , Jinze Li 1 , Xiaodi Sun 1 , Yongduo Yu 1 , Haoyang Xiong 1 , Liangxue Lai 1, 2 , Tingting Sui 1
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SpCas9和AsCas12a被广泛用作人类细胞中的基因组编辑工具,但它们的应用在很大程度上因其体积庞大而受到限制。最近,小尺寸(422 个氨基酸)的 AsCas12f1 蛋白已被证明能够切割双链 DNA 原型间隔子相邻基序 (PAM)。然而,编辑效率低、针对不同基因组位点的活性差异大一直限制其应用。在这里,我们证明工程化的 AsCas12f1 sgRNA 显着提高了人类细胞和小鼠胚胎的编辑效率。此外,我们在本研究中使用工程改造的 CRISPR-AsCas12f1 系统成功生成了三种稳定的小鼠突变疾病模型。总的来说,我们的工作揭示了工程化的 AsCas12f1 系统扩展了迷你 CRISPR 工具箱,为治疗应用提供了非凡的前景。





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更新日期:2024-01-28
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