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基于杂交链式反应的金属纳米颗粒标记使用ICP-MS同时检测与EV71相关的双microRNA
Analytica Chimica Acta ( IF 5.7 ) Pub Date : 2024-01-22 , DOI: 10.1016/j.aca.2024.342272
Yuxin Wang 1 , Lijun Shao 2 , Zhigang Zhao 2 , Chao Huang 3 , Yanni Jiao 2 , Dapeng Sun 2 , Rui Liu 4 , Dafeng Jiang 4 , Xibao Gao 5
Affiliation
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背景
由肠道病毒 71 (EV 71) 引起的手足口 (HMFD) 疾病与严重的临床表现密切相关,并且可能致命。通过检测血清中 miR296 和 miR16 的增量可以实现 EV 71 的早期检测。利用HCR放大信号,将生物信号转化为ICP-MS可检测的金属纳米颗粒信号,是一种在生物样品检测中比传统方法能够收集到更准确、更可靠信息的检测方法。
结果
我们描述了一种基于 HCR 标记的金属纳米颗粒 (NP) 的 ICP-MS 同时检测 miR296 和 miR16 的策略。简而言之,单链DNA(ssDNA)和磁珠(MBs),以及NPs和miRNA信号探针(Sp -miR )首先通过链霉亲和素-生物素识别系统缀合,构成ssDNA-MBs和NPs-Sp -分别是miR复合物。然后,后者复合物通过 HCR 与前者杂交,生成目标纳米传感器。然后,添加靶标并与 ssDNA 杂交,并将与 NP 的 HCR 复合物释放到溶液中。最后,通过ICP-MS测量了NP的相应信号。结果表明,该方法具有良好的灵敏度、良好的选择性和精密度。此外,当应用于具有复杂基质的生物样品时,所开发的方法还表现出良好的回收率(88% - 92%)和重现性(RSD<10%)。
意义
该方法有助于手足口病的早期诊断,并为进一步发展高通量生物标志物检测开辟思路。该策略在生物样品中检测 miR296 和 miR16 方面具有实际潜力,并为多种 miRNA 检测提供了一种有前途的工具。
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