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生成辅助噬菌体,用于通过双展示噬菌体荧光检测肽-靶标相互作用
Scientific Reports ( IF 3.8 ) Pub Date : 2023-11-02 , DOI: 10.1038/s41598-023-45087-2 Laura Maria De Plano 1 , Salvatore Oddo 1 , Salvatore P P Guglielmino 1 , Antonella Caccamo 1 , Sabrina Conoci 1, 2, 3, 4, 5
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更新日期:2023-11-03
Scientific Reports ( IF 3.8 ) Pub Date : 2023-11-02 , DOI: 10.1038/s41598-023-45087-2 Laura Maria De Plano 1 , Salvatore Oddo 1 , Salvatore P P Guglielmino 1 , Antonella Caccamo 1 , Sabrina Conoci 1, 2, 3, 4, 5
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噬菌体展示是一种分子生物学技术,可将外源肽呈现在噬菌体表面。它广泛用于生物标志物的发现、治疗性抗体的开发以及蛋白质-蛋白质相互作用的研究等应用。当在诊断和治疗监测测定中使用噬菌体时,必须将它们与能够揭示和量化噬菌体衣壳上展示的肽与感兴趣的靶标之间的相互作用的检测系统结合起来。这个过程通常在技术上具有挑战性并且成本高昂。在这里,我们生成了一个荧光辅助噬菌体载体,在衣壳蛋白的 pIII 框内显示 sfGFP。此外,我们通过将新开发的荧光辅助噬菌体载体与含有带有肽探针的工程pVIII的噬菌粒载体相结合,开发了可交换的双展示噬菌体系统。这样,sfGFP 和肽探针就会展示在同一个噬菌体颗粒上。值得注意的是,我们的双显示方法非常灵活,因为它可以轻松交换 pVIII 上显示的肽探针以获得所需的选择性,同时保留 sfGFP 基因,从而可以轻松地可视化和量化相互作用的肽探针。我们预计,与当前基于噬菌体的检测系统相比,该系统将减少时间和成本。
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