酵母Marmesin生物合成途径的重建与优化,ACS Synthetic Biology

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酵母Marmesin生物合成途径的重建与优化
ACS Synthetic Biology ( IF 3.7 ) Pub Date : 2023-09-28 , DOI: 10.1021/acssynbio.3c00267
Zhaoxin Wang _{1,

2} , Ying Zhou ₃ , Yuefei Wang _{1,

2} , Xiaohui Yan _{1,

2}

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Marmesin 在植物防御系统中至关重要，并具有多种生物活性。在这项研究中，我们在酿酒酵母BY4741 底盘中重建了 marmesin 生物合成途径。我们通过引入大肠杆菌衍生的ppsA来设计芳香族氨基酸 (AAA) 生物合成途径，以提高 AAA 前体磷酸烯醇丙酮酸的可用性，过表达反馈抑制抗性基因ARO4 ^K229L和ARO7 ^G141S以将代谢流引导至酪氨酸分支，以及删除ARO10、PDC5和PDC6以减少艾利希途径的副产物。对参与 marmesin 合成的伞形酮 6-二甲基烯丙基转移酶 (U6DT) 和 marmesin 合酶 (MS) 进行了优化，以提高 marmesin 产量。通过截短PcU6DT、FcMS和AtCPR1的跨膜结构域并增加编码截短酶的基因的拷贝数，提高了 Marmesin 的产量。最后，使用工程酵母菌株 MU5 在摇瓶中获得了 27.7 mg/L 的 marmesin 效价。构建的marmesin生产菌株为药用重要呋喃香豆素类药物的绿色、规模化生产奠定了基础。

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更新日期：2023-09-28

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