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斑马鱼心脏的动态和全体积成像方法
Developmental Biology ( IF 2.5 ) Pub Date : 2023-09-12 , DOI: 10.1016/j.ydbio.2023.09.002
Isaac Bakis 1 , Yuhan Sun 2 , Laila Abd Elmagid 1 , Xidi Feng 2 , Mher Garibyan 3 , Joycelyn K Yip 3 , Fang Zhou Yu 4 , Sayali Chowdhary 1 , Gerardo Esteban Fernandez 2 , Jingli Cao 1 , Megan L McCain 5 , Ching-Ling Lien 6 , Michael Rm Harrison 1
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组织发育和再生是涉及复杂细胞迁移和细胞间相互作用的动态过程。我们开发了一种用于发育和再生研究的组织互补延时和三维 （3D） 成像方案，我们在这里将其应用于斑马鱼心脏脉管系统。固定标本的 3D 成像首先用于以高分辨率定义主体，然后实时成像捕捉其动态变化。提取和清洁成年和幼年斑马鱼的心脏，为不同的成像方式做准备。对于整体 3D 共聚焦成像，准备具有天然荧光或免疫标记的单个或多个心脏以进行稳定或透明化，然后成像。对于实时成像，将心脏放置在预制的流体装置中，并放在温控显微镜上进行几天的培养和成像。该协议允许在 3D 环境中完全可视化形态发生过程，并提供跟踪细胞行为以补充体内和固定组织研究的能力。该培养和成像方案可应用于不同的细胞和组织类型。在这里，我们用它来观察斑马鱼冠状动脉脉管系统和心脏再生过程中冠状动脉内皮细胞的迁移。
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