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基于结构和AlphaFold的Cas13小型化策略
Nature Communications ( IF 14.7 ) Pub Date : 2023-09-08 , DOI: 10.1038/s41467-023-41320-8
Feiyu Zhao 1 , Tao Zhang 1 , Xiaodi Sun 1 , Xiyun Zhang 1 , Letong Chen 1 , Hejun Wang 1 , Jinze Li 1 , Peng Fan 1 , Liangxue Lai 1, 2, 3 , Tingting Sui 1 , Zhanjun Li 1
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更新日期:2023-09-09
Nature Communications ( IF 14.7 ) Pub Date : 2023-09-08 , DOI: 10.1038/s41467-023-41320-8
Feiyu Zhao 1 , Tao Zhang 1 , Xiaodi Sun 1 , Xiyun Zhang 1 , Letong Chen 1 , Hejun Wang 1 , Jinze Li 1 , Peng Fan 1 , Liangxue Lai 1, 2, 3 , Tingting Sui 1 , Zhanjun Li 1
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与各种效应域融合的小尺寸 Cas 核酸酶可实现广泛的功能。尽管有多种方法可以减小 Cas 核酸酶复合物的大小,但尚未证明有效或通用的方法可以实现蛋白质小型化。在这项研究中,我们建立了蛋白质小型化的相互作用、动力学和保守(IDC)策略,并基于 IDC 策略和 AlphaFold2 的组合生成了 Cas13 的五个紧凑变体,其具有与野生型酶相当的完整 RNA 结合和切割活性。此外,我们构建了一个RNA碱基编辑器mini-Vx和一个携带mini-RfxCas13d和crRNA表达盒的单个AAV(腺相关病毒),它们分别显示出高效的转化率和RNA敲低活性。总之,这些发现强调了一种基于 AlphaFold2 预测的结构生成小型 CRISPR/Cas13 系统的可行策略,从而能够针对基础研究和治疗应用进行 RNA 定向降解和 RNA 编辑。

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