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基于发夹开关的等温转录扩增,用于简单、灵敏地检测 MicroRNA
Analytical Chemistry ( IF 6.7 ) Pub Date : 2023-09-08 , DOI: 10.1021/acs.analchem.3c02051 Xi Long 1 , Tong Luo 1 , Panpan Yuan 1 , Yuqing Gan 1 , Hui Liu 1 , Zhiwei Deng 1 , Jiacheng Ding 1 , Zan Gong 1 , Yanjing Yang 1 , Shian Zhong 1
Analytical Chemistry ( IF 6.7 ) Pub Date : 2023-09-08 , DOI: 10.1021/acs.analchem.3c02051 Xi Long 1 , Tong Luo 1 , Panpan Yuan 1 , Yuqing Gan 1 , Hui Liu 1 , Zhiwei Deng 1 , Jiacheng Ding 1 , Zan Gong 1 , Yanjing Yang 1 , Shian Zhong 1
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简单、选择性和灵敏地检测临床样本中少量 miRNA 的能力非常有价值,但仍然是一个挑战。在这项工作中,我们利用精心设计的发夹开关提出了一种新颖的miRNA检测系统,其中T7引物、模板、目标识别序列和发光RNA适体模板被编辑并嵌入一个单链DNA发夹结构中。一开始,发夹开关维持发夹结构1,其中T7聚合酶的ds启动子被破坏,从而抑制T7聚合酶的转录反应。与靶标结合后,发夹开关1展开并转向发夹结构2。该开关启动体外T7转录反应,产生大量含有RNA适体的RNA转录物。因此,转录的大量 RNA 适体点亮了荧光团以进行定量分析。与现有的基于T7聚合酶的扩增系统相比,该策略具有简单、方便、高选择性和灵敏度等优点。实验结果表明我们可以实现缓冲液和复杂生物样品中miRNA的定量。
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更新日期:2023-09-08
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