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工程化大肠杆菌 MG1655 高效生产 3-脱酰基-4'-单磷酰脂质 A
Journal of Agricultural and Food Chemistry ( IF 5.7 ) Pub Date : 2023-09-01 , DOI: 10.1021/acs.jafc.3c00681
Zhen Wang 1, 2 , Aizhen Zhao 1, 2 , Jun Qiao 1, 2 , Jing Yu 1, 2 , Fenfang He 1, 2 , Yibing Bi 1, 2 , Letong Yu 1, 2 , Xiaoyuan Wang 1, 2, 3
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单磷酰脂质 A 源自明尼苏达沙门氏菌R595,已用于各种佐剂制剂中。大肠杆菌可以产生脂质A,但其结构不同。在这项研究中,大肠杆菌MG1655 被设计为有效生产单磷酰脂质 A。首先,MG1655 中与菌毛、鞭毛和 ECA 生物合成相关的 126 个基因被删除,产生了 WQM027。其次,从WQM027中进一步删除与磷脂转运系统相关的基因pldAmlaAmlaC、与碳水化合物磷酸转移酶系统相关的基因ptsG以及编码用于脂质A修饰的磷酸乙醇胺转移酶的基因eptA,得到MW020。第三,来自新杀弗朗西斯菌的lpxE和来自沙门氏菌的pagPpagL在 pFT24 中过表达,产生 pTEPL。将 pTEPL 转化至 MW020,产生 MW020/pTEPL。最后,从MW020/pTEPL的基因组中删除编码烯酰-ACP还原酶的fabI ,产生MW021/pTEPL。MW021/pTEPL 补料发酵 26 h 后可产生 85.31 mg/L 的脂质 A。MW021/pTEPL 中主要产生了两种单磷酰脂质 A,一种是 3-deacyl-2-acyloxyacyl-4'-monophoshoryl 脂质 A,另一种是 3-deacyl-4'-monophoshoryl 脂质 A。 E. coli MW021 / pTEPL本研究构建的宿主可能是工业化生产单磷酰脂质A的理想宿主。



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更新日期:2023-09-01
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