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南美白对虾多酚氧化酶的表达及其表征
Food Chemistry ( IF 8.5 ) Pub Date : 2023-08-25 , DOI: 10.1016/j.foodchem.2023.137258
Qian Hong 1 , Yu-Lei Chen 1 , Duanquan Lin 1 , Ru-Qing Yang 1 , Kai-Yuan Cao 2 , Ling-Jing Zhang 1 , Yi-Ming Liu 1 , Le-Chang Sun 1 , Min-Jie Cao 1
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多酚氧化酶 （PPO） 在虾品质下降中起着关键作用。为了获得活性 PPO 并阐明其酶学特性，克隆了来自南滨对虾 （Lv-PPO） 的 PPO，在大肠杆菌中表达并通过亲和柱色谱纯化。Lv-PPO 基因全长 2076 bp，编码 691 个氨基酸。成功表达分子量为 ∼85.0 kDa 的重组 Lv-PPO （rLv-PPO），并通过 LC-MS/MS 验证其序列。rLv-PPO 具有生物活性，最适温度为 40°C，最适 pH 为 6.0。金属离子 Cu2+ 和 Zn2+ 通过影响 rLv-PPO 的二级和三级结构来改变其活性。rLv-PPO 对 l-Dopa 和儿茶酚具有催化活性。制备了抗 rLv-PPO 的特异性多克隆抗体。Western blot 分析显示，PPO 水平在血淋巴中最高，其次是 Telson 、 Carashell 和 eyetalk。rLv-PPO 的表达将有助于未来研究虾黑色素病的机制。
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