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用于牛病毒性腹泻病毒 1 (BVDV-1) 和 BVDV-2 正确亚型的新基因组靶点
Virus Genes ( IF 1.9 ) Pub Date : 2023-08-17 , DOI: 10.1007/s11262-023-02022-x
Carolina Isabela Mucellini 1, 2 , José Valter Joaquim Silva Júnior 1, 3, 4 , Pablo Sebastian Britto de Oliveira 1, 2 , Rudi Weiblen 1 , Eduardo Furtado Flores 1
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全基因组系统发育分析是对牛病毒性腹泻病毒 1 (BVDV-1) 和 BVDV-2 进行分型的最合适策略,但对许多实验室来说并不可行。因此,BVDV 分离株/毒株经常根据单个基因组区域(主要是 5' 非翻译区 (UTR))的分析进行亚型分类。然而,这种方法可能导致病毒分类不准确和/或缺乏统计支持。在此,我们描述了新型引物组,其扩增子可以轻松测序并用于 BVDV 亚型分型。最初,对先前被描述为最适合 BVDV 亚型分型的靶标的基因组区域进行了分析,以设计高覆盖率引物。对假定的扩增子进行了计算机分析,以确定它们是否适合重现 118 个 BVDV-1 和 88 个 BVDV-2 完整/近完整基因组 (CNCG) (GenBank) 的系统发育分类。该分析还考虑了可通过引物 HCV90-368、324-326 和 BP189-389 (5'UTR) 扩增的区域,这些引物已用于 BVDV 诊断和/或分类。在确认我们的引物扩增子CNCG的分析之间的一致性后,我们优化了 RT-PCR 并评估了其扩增 BVDV 分离株/菌株的性能(BVDV-1 的 n = 35;BVDV-2 的 n = 33) 。在 BVDV 亚型分型的潜在目标中,我们为 NS3-NS4A (BVDV-1)(526 bp 扩增子)和 NS5B (BVDV-2)(728 bp)设计了高覆盖率引物。基于这些区域的分类完全再现了所有 CNCG 的子类型。另一方面,基于来自引物 HCV90-368、324-326 和 BP189-389 的推定扩增子的亚型分型显示出与 CNCG 分析相关的不一致。 NS3-NS4A 和 NS5B 引物还允许扩增所有测试的 BVDV 分离株/毒株。最后,我们建议在未来 BVDV 的系统发育和流行病学研究中使用这些引物。





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更新日期:2023-08-17
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