当前位置: X-MOL 学术ACS Synth. Biol. › 论文详情
Our official English website, www.x-mol.net, welcomes your feedback! (Note: you will need to create a separate account there.)

用于瞬时 DNA 传递的本塞姆氏烟草农杆菌感染的多重性

ACS Synthetic Biology ( IF 3.7 ) Pub Date : 2023-08-09 , DOI: 10.1021/acssynbio.3c00148
Erik D. Carlson , Jakub Rajniak , Elizabeth S. Sattely


农杆菌介导的生物 DNA 转移到植物细胞是植物系统工程和研究最强大的工具之一。转移 DNA (T-DNA) 的瞬时表达尤其能够快速测试基因产物,并已用于轻松组合表达多个基因。在类似的基于哺乳动物细胞的基因表达系统中,对感染复数 (MOI) 的清晰感知使用户能够预测和控制病毒转染频率,以满足每个细胞需要单次转染事件或多次转染事件的应用。尽管农杆菌介导的植物瞬时转化具有价值,但 MOI 尚未量化。在这里,我们分析了叶面细胞中 T-DNA 转移的泊松概率分布,以确定广泛使用的模型系统农杆菌GV3101/本塞姆氏烟草的MOI。这些数据描绘了单个农杆菌菌株渗透OD 600 、植物细胞周长和叶龄以及植物细胞共感染率之间的关系。我们的分析建立了实验方案,在该实验方案中,在渗透 OD 600高于 ∼0.2 的各个菌株中,几乎同时将 >20 个独特的 T-DNA 传递到给定植物细胞的概率在整个叶子中保持较高。相比之下,单菌株 T-DNA 递送可以在低菌株渗透 OD 600下实现:在 OD 600 0.02 时,我们观察到约 40% 的植物细胞被感染,其中 80% 的受感染细胞含有来自只是单一菌株。 我们预计这些数据将使用户能够利用农杆菌瞬时表达和单个植物细胞中多种异源蛋白的可靠组合测定来开发叶内文库开发的新方法。




"点击查看英文标题和摘要"

更新日期:2023-08-09
down
wechat
bug