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用于生物传感的核酸酶激活 CRISPR-Cas12a 和环状 CRISPR RNA
Small ( IF 13.0 ) Pub Date : 2023-06-09 , DOI: 10.1002/smll.202303007 Yunping Wu 1 , Dingran Chang 2 , Yangyang Chang 1 , Qiang Zhang 3 , Yi Liu 4 , John D Brennan 5 , Yingfu Li 2 , Meng Liu 1
Small ( IF 13.0 ) Pub Date : 2023-06-09 , DOI: 10.1002/smll.202303007 Yunping Wu 1 , Dingran Chang 2 , Yangyang Chang 1 , Qiang Zhang 3 , Yi Liu 4 , John D Brennan 5 , Yingfu Li 2 , Meng Liu 1
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成簇规则间隔短回文重复序列 (CRISPR)-Cas 系统越来越多地用于生物传感器开发。然而，将 CRISPR 对非核酸靶标的识别事件直接转化为有效的可测量信号是一个重要的持续挑战。在此，假设并证实环状拓扑中的 CRISPR RNA (crRNA) 有效地使 Cas12a 无法进行位点特异性双链 DNA 切割和非特异性单链 DNA 反式切割。重要的是，研究表明具有 RNA 切割活性的核酸酶 (NAzymes) 可以使环状 crRNA 线性化，从而激活 CRISPR-Cas12a 功能。使用配体响应性核酶和 DNAzyme 作为分子识别元件，证明了环状 crRNA 的靶点触发线性化为生物传感提供了巨大的多功能性。该策略被称为“NAzyme-Activated CRISPR-Cas12a with Circular CRISPR RNA (NA3C)”。进一步证明了NA3C 用于尿路感染临床评估的用途，使用大肠杆菌响应性 RNA 切割 DNAzyme 测试 40 名患者尿液样本，提供 100% 的诊断灵敏度和 90% 的特异性。
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更新日期：2023-06-09
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