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通过 20 种氨酰-tRNA 合成酶的部分再生进行体外转录/翻译偶联 DNA 复制
ACS Synthetic Biology ( IF 3.7 ) Pub Date : 2023-04-13 , DOI: 10.1021/acssynbio.3c00014 Katsumi Hagino 1 , Norikazu Ichihashi 1, 2, 3
ACS Synthetic Biology ( IF 3.7 ) Pub Date : 2023-04-13 , DOI: 10.1021/acssynbio.3c00014 Katsumi Hagino 1 , Norikazu Ichihashi 1, 2, 3
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类生命自我复制系统的体外重建是体外合成生物学的主要挑战。自我复制需要再生参与 DNA 复制、转录和翻译的所有分子。本研究首次在重构的转录/翻译系统（PURE 系统）中证明了主要翻译因子 20 种氨酰 tRNA 合成酶 (aaRS) 的连续 DNA 复制和部分再生。首先，我们通过连续转移实验从 DNA 中通过 aaRS 表达复制了编码 20 个 aaRS 之一的每个 DNA。此后，我们陆续增加了 aaRS 基因的数量，实现了编码所有 20 个 aaRS 的 DNA 同时、连续复制，这些 DNA 约占 PURE 系统中蛋白质因子数量的一半，核糖体除外，通过采用透析反应和序列优化。这项研究提供了一种逐步进行连续 DNA 复制的方法，其中越来越多的自我再生基因朝着自我复制的人工系统发展。
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更新日期：2023-04-13
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