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CRISPR/Cas12a 结合酶-DNA 分子开关光电化学检测 HIV 核酸
Microchemical Journal ( IF 4.9 ) Pub Date : 2023-04-01 , DOI: 10.1016/j.microc.2023.108713 Lilin Qin , Fangxu Lou , Yan Wang , Yinhao Zhang , Shishi Liu , Xu Hun
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更新日期：2023-04-06
Microchemical Journal ( IF 4.9 ) Pub Date : 2023-04-01 , DOI: 10.1016/j.microc.2023.108713 Lilin Qin , Fangxu Lou , Yan Wang , Yinhao Zhang , Shishi Liu , Xu Hun
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酶-DNA杂化化合物结合CRISPR-Cas12a顺式形成的分子开关-制造了用于光电化学核酸测定的裂解。形成了由 Taq DNA 聚合酶、适配体、block DNA 和亚甲蓝标记引物（引物-Mb）组成的复合分子开关。Block DNA 组装在 MBs 的表面（block DNA-MBs），并与引物-Mb 杂交。在存在人类免疫缺陷病毒 (HIV) 靶标的情况下，通过靶标与块 DNA 的杂交打开分子开关。Taq DNA 聚合酶被释放并激活。激活的 Taq DNA 聚合酶通过模板延长引物，封闭 DNA，附着在磁珠 (MB) 上。形成了具有 Mb 的 dsDNA (dsDNA-Mb)。在Cas12a的协助下，得到放大的光电化学信号，HIV靶DNA定性。在最好的条件下，检测限 (LOD) 可低至 0.3 fM。这种光电化学分析扩展了分子纳米技术的工具包。
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