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细胞外 ATP 激活的杂交链式反应可准确、灵敏地检测癌细胞
Chinese Chemical Letters ( IF 9.4 ) Pub Date : 2023-03-29 , DOI: 10.1016/j.cclet.2023.108399
Lie Li , Suping Li , Jie Wang , Xiaohong Wen , Mei Yang , Haiyan Chen , Qiuping Guo , Kemin Wang
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更新日期:2023-03-29
Chinese Chemical Letters ( IF 9.4 ) Pub Date : 2023-03-29 , DOI: 10.1016/j.cclet.2023.108399
Lie Li , Suping Li , Jie Wang , Xiaohong Wen , Mei Yang , Haiyan Chen , Qiuping Guo , Kemin Wang
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准确、灵敏地检测癌细胞对于癌症的早期诊断和治疗具有重要意义。在这里,我们开发了一种细胞外 ATP 激活的杂交链式反应 (HCR) 扩增策略来满足这一目的。这一策略依赖于三个DNA 探针、Apt-trigger、H1-ATP 适体双链体和发夹 H2。Apt 触发探针由两部分组成:用于特异性识别靶细胞的适体序列,以及用于 HCR 组装的触发序列。H1-ATP适配体的双链体结构使得发夹H1中的立足点被隐藏,从而阻止了发夹H1和Apt-trigger之间的链置换反应。用 ATP 激活后,ATP 适体将与 ATP 结合,从发夹 H1 上解离,从而导致 Apt 触发诱导的链置换反应,并随后与靶细胞表面上的发夹 H2 发生 HCR。受益于适体识别和 ATP 激活的 HCR 扩增,该策略不仅可以在 200 μL 结合缓冲液中进行灵敏的定量分析,检测限为 25 个细胞,而且还表现出从对照细胞和混合细胞样品中识别靶细胞所需的特异性和准确性。重要的是,该方法在10%胎牛血清中的靶细胞检测中保持了稳定和良好的性能,展示了复杂生物基质临床诊断的巨大潜力。此外,通过改变相应的适体序列,该策略可以适用于检测各种类型的癌细胞。
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