骨关节炎（OA）是一种以软骨退变和关节内炎症为特征的慢性退行性关节病。Daurisoline (DAS) 是一种从北豆根中分离出来的异喹啉生物碱，其抗肿瘤和抗炎药理作用已得到证实，但 DAS 对 OA 的影响却鲜有研究。在本研究中，我们旨在探讨 DAS 在 OA 中的潜在作用及其部分机制。通过 Cell Counting Kit-8 测定法检测 H2O2 和 DAS 对软骨细胞的细胞毒性。番红 O 染色用于检测软骨细胞表型变化。通过流式细胞术和通过蛋白质印迹对细胞凋亡相关因子 Bax、Bcl-2 和裂解的 caspase-3 的蛋白质水平进行定量分析来测量细胞凋亡。蛋白质印迹和免疫荧光用于评估自噬相关蛋白 LC3、Beclin-1 和 p62 的表达。此外，通过蛋白质印迹测量了关键信号通路目标和基质降解指标。我们的结果表明，H2O2 以剂量依赖的方式诱导人软骨细胞凋亡和激活自噬。DAS 处理剂量依赖性地逆转凋亡相关蛋白（Bax、Bcl-2 和裂解的半胱天冬酶 3）的表达和 H2O2 诱导的细胞凋亡率。蛋白质印迹和免疫荧光分析表明，DAS 降低了 H2O2 诱导的自噬标记物 Beclin-1 和 LC3 II/LC3 I 比率的上调，并上调了 p62 蛋白水平。从机械上讲，DAS 通过激活经典的 PI3K/AKT/mTOR 信号通路抑制自噬，并保护软骨细胞免于凋亡。此外，DAS 减轻了 H2O2 诱导的 II 型胶原降解和基质金属蛋白酶 3 (MMP3) 和 MMP13 的高表达。我们的研究表明，DAS 通过激活 PI3K/AKT/mTOR 信号通路减轻 H2O2 引起的软骨细胞自噬，并保护软骨细胞免于凋亡和基质降解。总之，这些发现表明 DAS 可作为一种有前途的 OA 治疗策略。我们的研究表明，DAS 通过激活 PI3K/AKT/mTOR 信号通路减轻 H2O2 引起的软骨细胞自噬，并保护软骨细胞免于凋亡和基质降解。总之，这些发现表明 DAS 可作为一种有前途的 OA 治疗策略。我们的研究表明，DAS 通过激活 PI3K/AKT/mTOR 信号通路减轻 H2O2 引起的软骨细胞自噬，并保护软骨细胞免于凋亡和基质降解。总之，这些发现表明 DAS 可作为一种有前途的 OA 治疗策略。



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