氨基酸参与体内各种化学反应，尿液中几种氨基酸的变化与某些疾病状态有关。因此，开发一种有效的尿液氨基酸分析方法有助于疾病的及时诊断。在这项研究中，我们开发了一种高效液相色谱 (HPLC) 荧光方法，使用荧光衍生化试剂 2,3-萘二甲醛 (NDA) 定量分析尿液氨基酸。选择 NDA 是因为它不需要加热进行反应，并且可以在短时间内发生反应，使其在临床环境中的使用变得可行。对反应温度、反应时间等衍生化条件进行了优化，发现反应在25℃下5 min即可完成。在梯度条件下，在十八烷基甲硅烷基 (ODS) 柱上研究了 NDA-氨基酸的分离。流动相是水-乙腈-三氟乙酸的混合物。十八个NDA-氨基酸（组氨酸（His）、精氨酸（Arg）、天冬酰胺（Asn）、谷氨酰胺（Gln）、瓜氨酸（Cit）、丝氨酸（Ser）、天冬氨酸（Asp）、苏氨酸（Thr）、谷氨酸（ Glu)、甘氨酸 (Gly)、酪氨酸 (Tyr)、丙氨酸 (Ala)、色氨酸 (Trp)、缬氨酸 (Val)、苯丙氨酸 (Phe)、异亮氨酸 (Ile)、亮氨酸 (Leu) 和 5-氨基戊酸（内部standard)) 在最佳条件下在 100 分钟内分离。校准曲线在每次进样 0.25–25 pmol 范围内显示出良好的线性，相关系数 > 0.998。NDA-氨基酸的定量限为 16.7-74.7 fmol。将开发的分析方法应用于人尿液样品，分析了 16 种氨基酸（His、Arg、Asn、Gln、Cit、Ser、Thr、Glu、Gly、Tyr、Ala、Trp、Val、Phe、Ile 和 Leu）量化。尿氨基酸浓度为 5–960 μM。使用这种方法进行的尿液氨基酸分析有望在临床上用作影响膀胱、泌尿道和肾脏的疾病的新型生物标志物。



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