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单个囊泡分析显示,高强度间歇性运动时,四跨宽蛋白阳性细胞外囊泡释放到循环中
The Journal of Physiology ( IF 4.7 ) Pub Date : 2023-02-28 , DOI: 10.1113/jp284047
Luke C McIlvenna 1, 2 , Hannah-Jade Parker 1, 3 , Alex P Seabright 1 , Benedict Sale 1 , Genevieve Anghileri 1, 4 , Samuel R C Weaver 1 , Samuel J E Lucas 1 , Martin Whitham 1, 3
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小的细胞外囊泡 (sEV) 从所有细胞类型中释放出来,并参与蛋白质、脂质、代谢物和核酸的细胞间交换。蛋白质组学、流式细胞术和纳米颗粒追踪分析表明,sEV 会随着运动而释放到循环中。然而,对这些数据的解释可能会受到不同分析方法引入的偏倚来源的影响。7 名健康参与者执行了高强度间歇训练 (HIIT) 循环方案,该方案包括 4 × 30 秒,工作速率相当于个人最大功率(瓦特)的 200%,穿插 4.5 分钟的主动恢复。在最后一次努力之前和之后立即收集 EDTA 处理的血液。贫血小板 (PPP) 和无血小板 (PFP) 血浆分别通过 2500 g 的一次或两次离心旋转(15 分钟,室温)获得。在自动血细胞计数器上计数血小板。使用 Exoview R100 平台评估血浆样品,该平台将表达常见跨膜四蛋白标志物 CD9、CD63、CD81 和 CD41a 的 sEV 固定在微流控芯片上,并借助荧光成像,以单个 sEV 分辨率计算它们的丰度,重要的是,无需预分离步骤。PFP 中的血小板数量低于 PPP,这与 CD9 、 CD63 和 CD41a 阳性 sEVs 的数量较低相关。HIIT 诱导 PPP 和 PFP 中 CD9 、 CD63 和 CD81 阳性 sEVs 荧光计数的增加。这些数据支持 sEV 随运动而释放到流通中的概念。此外,无血小板血浆是研究运动期间 sEV 动力学和表型的首选代表性分析物。
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