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单管巢式 PCR 检测包虫病的优化。
Experimental Parasitology ( IF 1.4 ) Pub Date : 2023-02-25 , DOI: 10.1016/j.exppara.2023.108494 Xueyong Zhang 1 , Yingna Jian 1 , Zhi Li 1 , Hong Duo 1 , Zhihong Guo 1 , Yong Fu 1
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更新日期：2023-03-02
Experimental Parasitology ( IF 1.4 ) Pub Date : 2023-02-25 , DOI: 10.1016/j.exppara.2023.108494 Xueyong Zhang 1 , Yingna Jian 1 , Zhi Li 1 , Hong Duo 1 , Zhihong Guo 1 , Yong Fu 1
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包虫病是由棘球蚴属的后吸虫引起的一种严重的人畜共患的危及生命的寄生虫病，需要适当的灵敏诊断和基因分型技术来检测感染和研究包虫属的遗传特征。隔离。在这项研究中，开发并评估了单管巢式 PCR (STNPCR) 方法，用于检测棘球蚴属。基于COI基因的 DNA。STNPCR 的灵敏度是常规 PCR 的 100 倍，与普通巢式 PCR (NPCR) 的灵敏度相同；但交叉污染的风险较低。所开发的 STNPCR 方法的检测限估计为 10 拷贝/μL 的重组标准质粒棘球蚴属 COI基因。在临床应用中，对8例囊肿组织标本和12例钙化组织标本进行外引物和内引物常规PCR分析，结果分别为100.00%（8/8）和8.33%（1/12），100.00%（8/8）和分别有 16.67% (2/12) 的阳性反应，而 STNPCR 和 NPCR 都能够在 100.00% (8/8) 和 83.33% (10/12) 的相同样品中鉴定出基因组 DNA 的存在。由于其高灵敏度和消除交叉污染的潜力，STNPCR 方法适用于棘球蚴的流行病学调查和特征遗传学研究属 组织样本。STNPCR 方法可以有效地从感染棘球蚴的钙化样品和囊肿残留物中扩增低浓度的基因组 DNA。随后，获得阳性PCR产物的序列，可用于棘球蚴的单倍型分析、遗传多样性和进化研究，以及对棘球蚴的认识。宿主之间的传播和传播。
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