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酿酒酵母中辣根过氧化物酶功能性分泌诱导表达系统的逐步优化
Journal of Agricultural and Food Chemistry ( IF 5.7 ) Pub Date : 2023-02-23 , DOI: 10.1021/acs.jafc.2c09117
Xinrui Zhao 1, 2, 3, 4 , Haibo Yu 1, 2 , Qingfeng Liang 1 , Jingwen Zhou 1, 2, 3, 4 , Jianghua Li 1, 2, 3, 4 , Guocheng Du 1, 2, 3, 4, 5 , Jian Chen 1, 2, 3, 4
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辣根过氧化物酶 (HRP) 是一种植物来源的糖蛋白,可开发为食品添加剂以交联蛋白质或生物聚合物。酿酒酵母虽然在生产食品级HRP方面具有优势,但其低表达水平和低效分泌阻碍了其应用价值。在比较了组成型和诱导型表达对细胞生长的影响后,通过替换GAL80中启动子的核心区域粗调了 HRP 表达的强度-敲除菌株并通过终止子筛选进一步微调。此外,选择最合适的信号肽,并修饰前肽与前肽以平衡HRP在内质网中的转运。最佳菌株的胞外HRP活性在发酵罐水平达到13 506 U/L,比之前在酿酒酵母中41 U/L的结果高330倍。该策略可用于减轻由毒性蛋白表达引起的细胞生长抑制并改善其分泌。



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更新日期:2023-02-23
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