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用于功能性果汁生产的耐酸 d-Allulose 3-差向异构酶工程
Journal of Agricultural and Food Chemistry ( IF 5.7 ) Pub Date : 2022-12-14 , DOI: 10.1021/acs.jafc.2c07153
Lei Li 1, 2, 3 , Qianqian Zhang 1, 2, 3 , Tong Wang 1, 2, 3 , Hongbin Qi 1, 2, 3 , Meijing Wei 1, 2, 3 , Fuping Lu 1, 2, 3 , Lijun Guan 4 , Shuhong Mao 1, 2, 3 , Hui-Min Qin 1, 2, 3
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d -Allulose 是一种稀有糖和功能性甜味剂,可通过d -allulose 3-异构酶 (DAE) 生物合成。然而,大多数报道的 DAEs 在酸性条件下表现出较差的耐受性,这严重限制了它们的应用。在这里,表面电荷工程和随机诱变被用于从解纤维梭菌构建 CcDAE 突变体文库H10,结合高通量筛选,鉴定在酸性条件下具有高活性和抗性的突变体。突变体 M3 (I114R/K123E/H209R) 在 pH 4.5 时表现出高活性(野生型的 3.36 倍)和耐酸性(野生型的 10.6 倍)。通过分子动力学 (MD) 模拟进一步分析了结构-功能关系,这表明 M3 具有比野生型更多的氢键和负表面电荷。包括 M3 在内的多酶级联系统用于转化酸性果汁中的高热量糖,并获得含有 7.8–15.4 g/L d-阿卢糖的功能性果汁。我们的研究拓宽了含有d -阿洛酮糖的功能性食品的制造范围。



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更新日期:2022-12-14
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