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用于 miR-146b 检测的双链特异性核酸酶 (DSN) 和催化发夹组装 (CHA) 介导的双重扩增方法
Analyst ( IF 3.6 ) Pub Date : 2022-12-13 , DOI: 10.1039/d2an01759h
Yu Han 1, 2 , Haihong Hu 2 , Lushan Yu 2 , Su Zeng 2 , Jun Zhe Min 1 , Sheng Cai 2
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使用双链特异性核酸酶信号放大 (DSNSA) 和催化发夹组装 (CHA) 的组合开发了一种检测 miRNA 的新方法。在这项工作中,设计了一种生物素化触发释放 (BTR) 探针,其 3' 端具有生物素基团,5' 端具有作为引发剂(催化剂 I)的 CHA 反应序列触发器,用于杂交目标 miRNA。引入 DSN 酶以启动 DSNSA。释放 miRNA 以消耗更多 BTR 探针并放大信号。随后,在DSNSA反应液中加入链霉亲和素包被的磁珠(SA-MBs),去除多余的未与miRNA杂交的BTR探针,分离BTR探针和catalyst-I,保证检测的高选择性和灵敏度. 残留在溶液中的催化剂-I 可以触发 CHA 反应,从而在第二步中实现信号放大。所开发的方法在识别家族成员之间的高序列同源性方面表现出灵敏的检测限和出色的选择性。



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更新日期:2022-12-13
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