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重组III型类人胶原蛋白在毕赤酵母中的高效分泌表达及表征
Bioresources and Bioprocessing ( IF 4.3 ) Pub Date : 2022-11-04 , DOI: 10.1186/s40643-022-00605-4 Zhi-Xiang Xiang 1 , Jin-Song Gong 1 , Jin-Hao Shi 1 , Chun-Fang Liu 1 , Heng Li 1 , Chang Su 1 , Min Jiang 1 , Zheng-Hong Xu 2, 3 , Jin-Song Shi 1
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胶原蛋白是体内含量最高的蛋白质,具有不可替代的生物功能,在食品、美容、医药等领域受到广泛关注,市场需求量很大。编码重组III型人样胶原α1链片段的基因经部分氨基酸取代后整合至毕赤酵母基因组中。结合启动子工程和高密度发酵技术,采用两阶段补料法实现了最高产量1.05 g L -1的可溶性分泌表达,亲和纯化后纯度可达96%。 N / C端蛋白序列测定与理论预期一致,显示出Gly-XY重复短肽序列的特征。氨基酸分析中,甘氨酸占27.02%,脯氨酸占23.92%,与胶原蛋白的特性相符。紫外光谱结合傅里叶变换红外光谱和质谱分析表明目标产物符合胶原蛋白光谱特征,在肉汤中以同源二聚体和三聚体存在。这项工作为重组 III 型类人胶原蛋白提供了可持续且经济可行的来源。
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