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基于刚果红的产胞外多糖嗜热链球菌高通量筛选方法的建立
Food Research International ( IF 7.0 ) Pub Date : 2022-11-02 , DOI: 10.1016/j.foodres.2022.112094 Zhiqiang Xiong 1 , Xin Tian 1 , Guangqiang Wang 1 , Xin Song 1 , Yongjun Xia 1 , Hui Zhang 1 , Lianzhong Ai 1
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更新日期:2022-11-02
Food Research International ( IF 7.0 ) Pub Date : 2022-11-02 , DOI: 10.1016/j.foodres.2022.112094 Zhiqiang Xiong 1 , Xin Tian 1 , Guangqiang Wang 1 , Xin Song 1 , Yongjun Xia 1 , Hui Zhang 1 , Lianzhong Ai 1
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作为增稠剂或稳定剂,胞外多糖 (EPS) 可以显着增强食品质地。然而,传统的EPS分析筛选方法效率低、耗时长,已不能满足当前工业生产的需要。需要一种简单快速的定性/定量方法来加速高 EPS 生产菌株的选择。在这里,通过结合刚果红琼脂法(CRA,初级筛选)和微孔板比色法(MPC,二级筛选),在嗜热链球菌中建立了用于 EPS 生产的高通量筛选 (HTS) 程序。相关系数 (R 2) CRA/MPC 和苯酚硫酸法(一种经典的 EPS 定量方法)之间的值分别为 0.779 和 0.862,表明该 HTS 方法的可行性。使用核糖体工程策略构建了嗜热链球菌的突变体文库(>300 个菌落),并通过我们开发的 HTS 方法快速获得了滴度从 50 mg/L 到 200 mg/L 的产 EPS 突变体,证实了HTS该方法简单、高效,可用于产EPS嗜热链球菌的分离。总之,开发这种 HTS 方法是为了快速筛选产 EPS 嗜热链球菌, 这不仅可以作为快速检测 EPS 生产能力的宝贵工具, 还可以用于筛选具有理想特性的基因工程菌株库。
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